Apoptotic action of E2F1 requires glycogen synthase kinase 3-beta activity in PC12 cells.
Both E2F1 and GSK3beta have been described as essential targets in neuronal apoptosis. Previous studies have demonstrated that GSK3beta binds to E2F1 in vivo. We wanted to investigate whether these proteins could share a common apoptotic signal pathway in neuronal cells. With this intention, we developed a PC12 ER-E2F1 stable cell line in which E2F1 activity was dependent on the presence of 4-hydroxitamoxifen. E2F1 activation produced apoptosis in naive and post-mitotic cells; serum and nerve growth factor respectively protected them from E2F1 apoptotic stimuli. The presence of specific GSK3beta inhibitors SB216763 and LiCl completely protected cells from apoptosis induced by E2F1 activation. In addition, knocked down GSK3beta experiments by small interference RNAs have demonstrated that a reduction of GSK3beta protein levels can lower the apoptotic effect of E2F1. Finally, we demonstrated that the apoptotic effect of E2F1 is not due to the regulation of GSK3beta activity, and that the inhibitory effect of GSK3beta inhibitor SB216763 on E2F1 induced apoptosis could be due to an alteration in the E2F1-regulated transcription gene pattern. In summary, we have demonstrated that the apoptotic action of E2F1 requires GSK3beta activity.
Espada
Lilia
L
Departament de Bioquímica i Biologia Molecular, Facultat de Farmàcia, Universitat de Barcelona, Barcelona, Catalunya, SpainLaboratori de Neuropatologia Molecular, Departament de Ciències Mèdiques Básiques, Universitat de Lleida, Lleida, Catalunya, SpainCentre d'Oncologia Molecular, Institut de Recerca Oncologica-Institut d'Investigació Biomèdica de Bellvitge (IDIBELL), L'Hospitalet, Barcelona, Catalunya, Spain.
Udapudi
Basavaraj
B
Departament de Bioquímica i Biologia Molecular, Facultat de Farmàcia, Universitat de Barcelona, Barcelona, Catalunya, SpainLaboratori de Neuropatologia Molecular, Departament de Ciències Mèdiques Básiques, Universitat de Lleida, Lleida, Catalunya, SpainCentre d'Oncologia Molecular, Institut de Recerca Oncologica-Institut d'Investigació Biomèdica de Bellvitge (IDIBELL), L'Hospitalet, Barcelona, Catalunya, Spain.
Podlesniy
Petar
P
Departament de Bioquímica i Biologia Molecular, Facultat de Farmàcia, Universitat de Barcelona, Barcelona, Catalunya, SpainLaboratori de Neuropatologia Molecular, Departament de Ciències Mèdiques Básiques, Universitat de Lleida, Lleida, Catalunya, SpainCentre d'Oncologia Molecular, Institut de Recerca Oncologica-Institut d'Investigació Biomèdica de Bellvitge (IDIBELL), L'Hospitalet, Barcelona, Catalunya, Spain.
Fabregat
Isabel
I
Departament de Bioquímica i Biologia Molecular, Facultat de Farmàcia, Universitat de Barcelona, Barcelona, Catalunya, SpainLaboratori de Neuropatologia Molecular, Departament de Ciències Mèdiques Básiques, Universitat de Lleida, Lleida, Catalunya, SpainCentre d'Oncologia Molecular, Institut de Recerca Oncologica-Institut d'Investigació Biomèdica de Bellvitge (IDIBELL), L'Hospitalet, Barcelona, Catalunya, Spain.
Espinet
Carme
C
Departament de Bioquímica i Biologia Molecular, Facultat de Farmàcia, Universitat de Barcelona, Barcelona, Catalunya, SpainLaboratori de Neuropatologia Molecular, Departament de Ciències Mèdiques Básiques, Universitat de Lleida, Lleida, Catalunya, SpainCentre d'Oncologia Molecular, Institut de Recerca Oncologica-Institut d'Investigació Biomèdica de Bellvitge (IDIBELL), L'Hospitalet, Barcelona, Catalunya, Spain.
Tauler
Albert
A
Departament de Bioquímica i Biologia Molecular, Facultat de Farmàcia, Universitat de Barcelona, Barcelona, Catalunya, SpainLaboratori de Neuropatologia Molecular, Departament de Ciències Mèdiques Básiques, Universitat de Lleida, Lleida, Catalunya, SpainCentre d'Oncologia Molecular, Institut de Recerca Oncologica-Institut d'Investigació Biomèdica de Bellvitge (IDIBELL), L'Hospitalet, Barcelona, Catalunya, Spain.
D000818:Animals; D017209:Apoptosis / Q000187:drug effects / Q000502:physiology*; D015536:Down-Regulation / Q000235:genetics; D050687:E2F1 Transcription Factor / Q000502:physiology*; D004791:Enzyme Inhibitors / Q000494:pharmacology; D004965:Estrogen Antagonists / Q000494:pharmacology; D015971:Gene Expression Regulation, Enzymologic / Q000187:drug effects / Q000502:physiology; D038362:Glycogen Synthase Kinase 3 / Q000037:antagonists & inhibitors / Q000235:genetics / Q000378:metabolism*; D000071679:Glycogen Synthase Kinase 3 beta; D009474:Neurons / Q000187:drug effects / Q000378:metabolism*; D016716:PC12 Cells; D034741:RNA, Small Interfering / Q000235:genetics; D051381:Rats; D015398:Signal Transduction / Q000187:drug effects / Q000502:physiology*; D013629:Tamoxifen / Q000031:analogs & derivatives / Q000494:pharmacology; D015533:Transcriptional Activation / Q000187:drug effects / Q000235:genetics
D050687:E2F1 Transcription Factor; C493755:E2f1 protein, rat; D004791:Enzyme Inhibitors; D004965:Estrogen Antagonists; D034741:RNA, Small Interfering; D013629:Tamoxifen; C016601:afimoxifene; D000071679:Glycogen Synthase Kinase 3 beta; C000605508:Gsk3b protein, rat; D038362:Glycogen Synthase Kinase 3