title: Contribution of Sp1 to Telomerase Expression and Activity in Skin Keratinocytes Cultured With a Feeder Layer.
abstract: The growth of primary keratinocytes is improved by culturing them with a feeder layer. The aim of this study was to assess whether the feeder layer increases the lifespan of cultured epithelial cells by maintaining or improving telomerase activity and expression. The addition of an irradiated fibroblast feeder layer of either human or mouse origin (i3T3) helped maintain telomerase activity as well as expression of the transcription factor Sp1 in cultured keratinocytes. In contrast, senescence occurred earlier, together with a reduction of Sp1 expression and telomerase activity, in keratinocytes cultured without a feeder layer. Telomerase activity was consistently higher in keratinocytes grown on the three different feeder layers tested relative to cells grown without them. Suppression of Sp1 expression by RNA inhibition (RNAi) reduced both telomerase expression and activity in keratinocytes and also abolished their long-term growth capacity suggesting that Sp1 is a key regulator of both telomerase gene expression and cell cycle progression of primary cultured human skin keratinocytes. The results of the present study therefore suggest that the beneficial influence of the feeder layer relies on its ability to preserve telomerase activity in cultured human keratinocytes through the maintenance of stable levels of Sp1 expression.
authors: Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.|Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.
authors: Francis
authors: F
authors: Bisson
authors: Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.|Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.
authors: Claudie
authors: C
authors: Paquet
authors: Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.|Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.
authors: Jean-Michel
authors: JM
authors: Bourget
authors: Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.|CUO-Recherche, Québec, Canada.
authors: Karine
authors: K
authors: Zaniolo
authors: Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.|Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.|CUO-Recherche, Québec, Canada.|Département d'Ophtalmologie et ORL-Chirurgie Cervico-Faciale, Faculté de Médecine, Université Laval, Québec, Canada.
authors: Patrick J
authors: PJ
authors: Rochette
authors: Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.|Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.|CUO-Recherche, Québec, Canada.|Département d'Ophtalmologie et ORL-Chirurgie Cervico-Faciale, Faculté de Médecine, Université Laval, Québec, Canada.
authors: Solange
authors: S
authors: Landreville
authors: Banque de Tissus et Cellules HCL, Laboratoire des Substituts Cutanés (LSC) CNRS UPR-412, Hôpital Edouard Herriot, Lyon, France.
authors: Odile
authors: O
authors: Damour
authors: Département d'Anatomie et de Biologie Cellulaire, Faculté de Médecine, Université de Sherbrooke, Sherbrooke, Canada.
authors: François
authors: F
authors: Boudreau
authors: Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.|Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.|CUO-Recherche, Québec, Canada.|Département d'Ophtalmologie et ORL-Chirurgie Cervico-Faciale, Faculté de Médecine, Université Laval, Québec, Canada.|Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Université Laval, Québec, Canada.
authors: François A
authors: FA
authors: Auger
authors: Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.|Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.|CUO-Recherche, Québec, Canada.|Département d'Ophtalmologie et ORL-Chirurgie Cervico-Faciale, Faculté de Médecine, Université Laval, Québec, Canada.
authors: Sylvain L
authors: SL
authors: Guérin
authors: Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.|Centre de Recherche FRQS du CHU de Québec, Québec, Canada.|CUO-Recherche, Québec, Canada.|Département d'Ophtalmologie et ORL-Chirurgie Cervico-Faciale, Faculté de Médecine, Université Laval, Québec, Canada.|Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Université Laval, Québec, Canada.
authors: Lucie
authors: L
authors: Germain
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