title: Locked by Design: A Conformationally Constrained Transglutaminase Tag Enables Efficient Site-Specific Conjugation.
abstract: Based on the crystal structure of a natural protein substrate for microbial transglutaminase, an enzyme that catalyzes protein crosslinking, a recognition motif for site-specific conjugation was rationally designed. Conformationally locked by an intramolecular disulfide bond, this structural mimic of a native conjugation site ensured efficient conjugation of a reporter cargo to the therapeutic monoclonal antibody cetuximab without erosion of its binding properties.
authors.affiliation: Clemens-Schöpf-Institut für Organische Chemie und Biochemie, Technische Universität Darmstadt, Alarich-Weiss-Straße 4, 64287 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Vanessa
authors.initials: V
authors.lastname: Siegmund
authors.affiliation: Arbeitsgruppe Strukturbiologie der Autophagie, Abteilung Struktur und Funktion der Proteine, Helmholtz-Zentrum für Infektionsforschung, Inhoffenstr. 7, 38124 Braunschweig (Germany).
authors.forename: Stefan
authors.initials: S
authors.lastname: Schmelz
authors.affiliation: Clemens-Schöpf-Institut für Organische Chemie und Biochemie, Technische Universität Darmstadt, Alarich-Weiss-Straße 4, 64287 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Stephan
authors.initials: S
authors.lastname: Dickgiesser
authors.affiliation: Clemens-Schöpf-Institut für Organische Chemie und Biochemie, Technische Universität Darmstadt, Alarich-Weiss-Straße 4, 64287 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Jan
authors.initials: J
authors.lastname: Beck
authors.affiliation: Clemens-Schöpf-Institut für Organische Chemie und Biochemie, Technische Universität Darmstadt, Alarich-Weiss-Straße 4, 64287 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Aileen
authors.initials: A
authors.lastname: Ebenig
authors.affiliation: Clemens-Schöpf-Institut für Organische Chemie und Biochemie, Technische Universität Darmstadt, Alarich-Weiss-Straße 4, 64287 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Heiko
authors.initials: H
authors.lastname: Fittler
authors.affiliation: Institut für Organische und Biomolekulare Chemie, Zentrale Analytik/Massenspektrometrie, Georg-August-Universität Göttingen, Tammannstr. 2, 37077 Göttingen (Germany).
authors.forename: Holm
authors.initials: H
authors.lastname: Frauendorf
authors.affiliation: Merck KGaA, Frankfurterstr. 250, 64293 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Birgit
authors.initials: B
authors.lastname: Piater
authors.affiliation: Merck KGaA, Frankfurterstr. 250, 64293 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Ulrich A K
authors.initials: UA
authors.lastname: Betz
authors.affiliation: Clemens-Schöpf-Institut für Organische Chemie und Biochemie, Technische Universität Darmstadt, Alarich-Weiss-Straße 4, 64287 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Olga
authors.initials: O
authors.lastname: Avrutina
authors.affiliation: Arbeitsgruppe Strukturbiologie der Autophagie, Abteilung Struktur und Funktion der Proteine, Helmholtz-Zentrum für Infektionsforschung, Inhoffenstr. 7, 38124 Braunschweig (Germany).
authors.forename: Andrea
authors.initials: A
authors.lastname: Scrima
authors.affiliation: Fachbereich Chemie- und Biotechnologie, Hochschule Darmstadt, Schnittspahnstraße 12, 64287 Darmstadt (Germany).
authors.forename: Hans-Lothar
authors.initials: HL
authors.lastname: Fuchsbauer
authors.affiliation: Clemens-Schöpf-Institut für Organische Chemie und Biochemie, Technische Universität Darmstadt, Alarich-Weiss-Straße 4, 64287 Darmstadt (Germany). Kolmar@biochemie-tud.de.
authors.forename: Harald
authors.initials: H
authors.lastname: Kolmar
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keywords: antibodies; bioconjugation; protein engineering; site-specific ligation; transglutaminase