title: Experimental evidence and molecular modeling of the interaction between hRSV-NS1 and quercetin.
abstract: Human Respiratory Syncytial Virus is one of the major causes of acute respiratory infections in children, causing bronchiolitis and pneumonia. Non-Structural Protein 1 (NS1) is involved in immune system evasion, a process that contributes to the success of hRSV replication. This protein can act by inhibiting or neutralizing several steps of interferon pathway, as well as by silencing the hRSV ribonucleoproteic complex. There is evidence that quercetin can reduce the infection and/or replication of several viruses, including RSV. The aims of this study include the expression and purification of the NS1 protein besides experimental and computational assays of the NS1-quercetin interaction. CD analysis showed that NS1 secondary structure composition is 30% alpha-helix, 21% beta-sheet, 23% turn and 26% random coils. The melting temperature obtained through DSC analysis was around 56°C. FRET analysis showed a distance of approximately 19Å between the NS1 and quercetin. Fluorescence titration results showed that the dissociation constant of the NS1-quercetin interaction was around 10(-6)M. In thermodynamic analysis, the enthalpy and entropy balanced forces indicated that the NS1-quercetin interaction presented both hydrophobic and electrostatic contributions. The computational results from the molecular modeling for NS1 structure and molecular docking regarding its interaction with quercetin corroborate the experimental data.
authors.affiliation: Departamento de Física-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil; Centro Multiusuário de Inovação Biomolecular (CMIB)-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil. Electronic address: derianegomes1@gmail.com.
authors.forename: Deriane Elias
authors.initials: DE
authors.lastname: Gomes
authors.affiliation: Departamento de Física-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil; Centro Multiusuário de Inovação Biomolecular (CMIB)-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil. Electronic address: ykrocaruso@hotmail.com.
authors.forename: Ícaro Putinhon
authors.initials: ÍP
authors.lastname: Caruso
authors.affiliation: Departamento de Física-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil; Centro Multiusuário de Inovação Biomolecular (CMIB)-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil. Electronic address: bicamposaraujo@hotmail.com.
authors.forename: Gabriela Campos
authors.initials: GC
authors.lastname: de Araujo
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authors.forename: Isabella Otenio
authors.initials: IO
authors.lastname: de Lourenço
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authors.forename: Fernando Alves
authors.initials: FA
authors.lastname: de Melo
authors.affiliation: Departamento de Física-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil; Centro Multiusuário de Inovação Biomolecular (CMIB)-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil. Electronic address: mario@ibilce.com.br.
authors.forename: Marinônio Lopes
authors.initials: ML
authors.lastname: Cornélio
authors.affiliation: Departamento de Física-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil; Centro Multiusuário de Inovação Biomolecular (CMIB)-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil. Electronic address: marcelo@ibilce.unesp.br.
authors.forename: Marcelo Andrés
authors.initials: MA
authors.lastname: Fossey
authors.affiliation: Departamento de Física-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil; Centro Multiusuário de Inovação Biomolecular (CMIB)-Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE) Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" (UNESP)-Campus de São José do Rio Preto-SP. Rua Cristóvão Colombo, 2265, Jardim Nazareth, Cep: 15054-000 São José do Rio Preto, SP, Brazil. Electronic address: fatyssouza@gmail.com.
authors.forename: Fátima Pereira
authors.initials: FP
authors.lastname: de Souza
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