A real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction for detection and quantification of Vesiculovirus.
Vesiculoviruses (VSV) are zoonotic viruses that cause vesicular stomatitis disease in cattle, horses and pigs, as well as sporadic human cases of acute febrile illness. Therefore, diagnosis of VSV infections by reliable laboratory techniques is important to allow a proper case management and implementation of strategies for the containment of virus spread. We show here a sensitive and reproducible real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) for detection and quantification of VSV. The assay was evaluated with arthropods and serum samples obtained from horses, cattle and patients with acute febrile disease. The real-time RT-PCR amplified the Piry, Carajas, Alagoas and Indiana Vesiculovirus at a melting temperature 81.02 ± 0.8ºC, and the sensitivity of assay was estimated in 10 RNA copies/mL to the Piry Vesiculovirus. The viral genome has been detected in samples of horses and cattle, but not detected in human sera or arthropods. Thus, this assay allows a preliminary differential diagnosis of VSV infections.
Universidade de São Paulo, Universidade de São Paulo, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Centro de Pesquisa em Virologia, Ribeirão Preto SP , Brasil, Universidade de São Paulo, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Centro de Pesquisa em Virologia, Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Aline Lavado
AL
Tolardo
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William Marciel de
WM
Souza
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Marilia Farignoli
MF
Romeiro
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Luiz Carlos
LC
Vieira
Universidade de São Paulo, Universidade de São Paulo, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Centro de Pesquisa em Virologia, Ribeirão Preto SP , Brasil, Universidade de São Paulo, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Centro de Pesquisa em Virologia, Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Luciano Kleber de Souza
LK
Luna
Universidade de São Paulo, Universidade de São Paulo, Instituto de Ciências Biomédicas, Laboratório de Virologia Clínica e Molecular, São Paulo SP , Brasil, Universidade de São Paulo, Instituto de Ciências Biomédicas, Laboratório de Virologia Clínica e Molecular, São Paulo, SP, Brasil.
Dyana Alves
DA
Henriques
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Jansen de
Jd
Araujo
Universidade Federal de Mato Grosso, Universidade Federal de Mato Grosso, Instituto de Ciências da Saúde, Centro Universitário de Sinop, Sinop MT , Brasil, Universidade Federal de Mato Grosso, Instituto de Ciências da Saúde, Centro Universitário de Sinop, Sinop, MT, Brasil.
Carlos Eduardo Hassegawa
CE
Siqueira
Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Laboratório de Pesquisa em Virologia, São José do Rio Preto SP , Brasil, Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Laboratório de Pesquisa em Virologia, São José do Rio Preto, SP, Brasil.
Tatiana Elias
TE
Colombo
Universidade de São Paulo, Universidade de São Paulo, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas, Ribeirão Preto SP , Brasil, Universidade de São Paulo, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas, Laboratório de Virologia, Ribeirão Preto, SP, Brasil.
Victor Hugo
VH
Aquino
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Benedito Antonio Lopes da
BA
Fonseca
Universidade Federal de Mato Grosso, Universidade Federal de Mato Grosso, Instituto de Ciências da Saúde, Centro Universitário de Sinop, Sinop MT , Brasil, Universidade Federal de Mato Grosso, Instituto de Ciências da Saúde, Centro Universitário de Sinop, Sinop, MT, Brasil.
Roberta Vieira de Morais
RV
Bronzoni
Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Laboratório de Pesquisa em Virologia, São José do Rio Preto SP , Brasil, Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Laboratório de Pesquisa em Virologia, São José do Rio Preto, SP, Brasil.
Maurício Lacerda
ML
Nogueira
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Edison Luiz
EL
Durigon
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Luiz Tadeu Moraes
LT
Figueiredo
D000818:Animals; D002417:Cattle; D006736:Horses / Q000821:virology; D006801:Humans; D012367:RNA, Viral / Q000235:genetics; D060888:Real-Time Polymerase Chain Reaction; D015203:Reproducibility of Results; D020133:Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction; D012680:Sensitivity and Specificity; D054243:Vesicular Stomatitis / Q000175:diagnosis*; D018116:Vesiculovirus / Q000235:genetics*
D012367:RNA, Viral