title: Online Capillary IsoElectric Focusing-ElectroSpray Ionization Mass Spectrometry (CIEF-ESI MS) in Glycerol-Water Media for the Separation and Characterization of Hydrophilic and Hydrophobic Proteins.
abstract: Capillary isoelectric focusing (CIEF) is a high-resolution technique for the separation of ampholytes, such as proteins, according to their isoelectric point. CIEF coupled online with MS is regarded as a promising alternative to 2-D PAGE for fast proteome analysis with high-resolving capabilities and enhanced structural information without the drawbacks of conventional slab-gel electrophoresis. However, online coupling has been rarely described, as it presents some difficulties. A new methodology for the online coupling of CIEF with electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) has been developed in glycerol-water media. This new integrated methodology provides a mean for the characterization of a large number of hydrophilic and hydrophobic proteins.
authors.affiliation: Chimie ParisTech, PSL Research University Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, Paris, 75005, France.|INSERM, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé (n° 1022), Paris, 75005, France.|CNRS, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la santé UMR 8258, Paris, 75005, France.|Université Paris Descartes, Sorbonne Paris Cité, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, Paris, 75005, France.
authors.forename: Meriem
authors.initials: M
authors.lastname: Mokaddem
authors.affiliation: Chimie ParisTech, PSL Research University Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, Paris, 75005, France.|INSERM, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé (n° 1022), Paris, 75005, France.|CNRS, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la santé UMR 8258, Paris, 75005, France.|Université Paris Descartes, Sorbonne Paris Cité, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, Paris, 75005, France.
authors.forename: Fanny
authors.initials: F
authors.lastname: d'Orlyé
authors.affiliation: Chimie ParisTech, PSL Research University Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, Paris, 75005, France. anne.varenne@chimie-paristech.fr.|INSERM, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé (n° 1022), Paris, 75005, France. anne.varenne@chimie-paristech.fr.|CNRS, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la santé UMR 8258, Paris, 75005, France. anne.varenne@chimie-paristech.fr.|Université Paris Descartes, Sorbonne Paris Cité, Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, Paris, 75005, France. anne.varenne@chimie-paristech.fr.
authors.forename: Anne
authors.initials: A
authors.lastname: Varenne
mesh_terms: D005990:Glycerol / Q000737:chemistry; D006863:Hydrogen-Ion Concentration; D007525:Isoelectric Focusing / Q000379:methods*; D011506:Proteins / Q000737:chemistry / Q000302:isolation & purification*; D021241:Spectrometry, Mass, Electrospray Ionization / Q000379:methods*; D014867:Water / Q000737:chemistry
chemical_list: D011506:Proteins; D014867:Water; D005990:Glycerol
keywords: Ampholytes; Amphoteric compound; Glycerol anticonvective medium; Isoelectric focusing; Isoelectric point and mass determination; Mass spectrometry; Protein