Validation of a new technique to detect Cryptosporidium spp. oocysts in bovine feces.
Due to its important zoonotic potential, cryptosporidiosis arouses strong interest in the scientific community, because, it was initially considered a rare and opportunistic disease. The parasitological diagnosis of the causative agent of this disease, the protozoan Cryptosporidium spp., requires the use of specific techniques of concentration and permanent staining, which are laborious and costly, and are difficult to use in routine laboratory tests. In view of the above, we conducted the feasibility, development, evaluation and intralaboratory validation of a new parasitological technique for analysis in optical microscopy of Cryptosporidium spp. oocysts, called TF-Test Coccidia, using fecal samples from calves from the city of Araçatuba, São Paulo. To confirm the aforementioned parasite and prove the diagnostic efficiency of the new technique, we used two established methodologies in the scientific literature: parasite concentration by centrifugal sedimentation and negative staining with malachite green (CSN-Malachite) and Nested-PCR. We observed good effectiveness of the TF-Test Coccidia technique, being statistically equivalent to CSN-Malachite. Thus, we verified the effectiveness of the TF-Test Coccidia parasitological technique for the detection of Cryptosporidium spp. oocysts and observed good concentration and morphology of the parasite, with a low amount of debris in the fecal smear.
UNESP - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba, Araçatuba, São Paulo, Brazil. Electronic address: sandra_byol@yahoo.com.br.
Sandra Valéria
SV
Inácio
UNICAMP, Universidade Estadual de Campinas, Institutos de Biologia e Computação, Campinas, São Paulo, Brazil. Electronic address: jgomes@ic.unicamp.br.
Jancarlo Ferreira
JF
Gomes
UNESP - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba, Araçatuba, São Paulo, Brazil. Electronic address: bruno.9988@hotmail.com.
Bruno César Miranda
BCM
Oliveira
UNICAMP, Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Computação, Campinas, São Paulo, Brazil. Electronic address: afalcao@ic.unicamp.br.
Alexandre Xavier
AX
Falcão
UNICAMP, Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Computação, Campinas, São Paulo, Brazil. Electronic address: celso.suzuki@gmail.com.
Celso Tetsuo Nagase
CTN
Suzuki
UNICAMP, Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, São Paulo, Brazil. Electronic address: biancamsantos@yahoo.com.br.
Bianca Martins
BM
Dos Santos
UNESP - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba, Araçatuba, São Paulo, Brazil. Electronic address: monallyaquino@yahoo.com.br.
Monally Conceição Costa
MCC
de Aquino
UNESP - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba, Araçatuba, São Paulo, Brazil. Electronic address: rafaela.ribeiro123@hotmail.com.
Rafaela Silva
RS
de Paula Ribeiro
UNESP - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba, Araçatuba, São Paulo, Brazil. Electronic address: danilla.assuncao@hotmail.com.
Danilla Mendes
DM
de Assunção
UNESP - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba, Araçatuba, São Paulo, Brazil. Electronic address: pamellacasemiro@hotmail.com.
Pamella Almeida Freire
PAF
Casemiro
UNESP - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba, Araçatuba, São Paulo, Brazil. Electronic address: marcelo@fmva.unesp.br.
Marcelo Vasconcelos
MV
Meireles
UNESP - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba, Araçatuba, São Paulo, Brazil. Electronic address: bresciani@fmva.unesp.br.
Katia Denise Saraiva
KDS
Bresciani
D000822:Animal Husbandry / Q000379:methods*; D000818:Animals; D001938:Brazil; D002417:Cattle; D002418:Cattle Diseases / Q000175:diagnosis* / Q000469:parasitology; D003457:Cryptosporidiosis / Q000175:diagnosis* / Q000469:parasitology; D005243:Feces / Q000469:parasitology*; D008853:Microscopy / Q000379:methods*; D033661:Oocysts; D010270:Parasite Egg Count / Q000662:veterinary; D010274:Parasitology / Q000379:methods*
Coccidiosis; Diagnostic; Parasites