Acute Ethanol Intake Induces NAD(P)H Oxidase Activation and Rhoa Translocation in Resistance Arteries.
The mechanism underlying the vascular dysfunction induced by ethanol is not totally understood. Identification of biochemical/molecular mechanisms that could explain such effects is warranted.
To investigate whether acute ethanol intake activates the vascular RhoA/Rho kinase pathway in resistance arteries and the role of NAD(P)H oxidase-derived reactive oxygen species (ROS) on such response. We also evaluated the requirement of p47phox translocation for ethanol-induced NAD(P)H oxidase activation.
Male Wistar rats were orally treated with ethanol (1g/kg, p.o. gavage) or water (control). Some rats were treated with vitamin C (250 mg/kg, p.o. gavage, 5 days) before administration of water or ethanol. The mesenteric arterial bed (MAB) was collected 30 min after ethanol administration.
Vitamin C prevented ethanol-induced increase in superoxide anion (O2-) generation and lipoperoxidation in the MAB. Catalase and superoxide dismutase activities and the reduced glutathione, nitrate and hydrogen peroxide (H2O2) levels were not affected by ethanol. Vitamin C and 4-methylpyrazole prevented the increase on O2- generation induced by ethanol in cultured MAB vascular smooth muscle cells. Ethanol had no effect on phosphorylation levels of protein kinase B (Akt) and eNOS (Ser1177 or Thr495 residues) or MAB vascular reactivity. Vitamin C prevented ethanol-induced increase in the membrane: cytosol fraction ratio of p47phox and RhoA expression in the rat MAB.
Acute ethanol intake induces activation of the RhoA/Rho kinase pathway by a mechanism that involves ROS generation. In resistance arteries, ethanol activates NAD(P)H oxidase by inducing p47phox translocation by a redox-sensitive mechanism.
O mecanismo da disfunção vascular induzido pelo consumo de etanol não é totalmente compreendido. Justifica-se, assim a identificação de mecanismos bioquímicos e moleculares que poderiam explicar tais efeitos.
Investigar se a ingestão aguda de etanol ativa a via vascular RhoA/Rho quinase em artérias de resistência e o papel das espécies reativas de oxigênio (ERO) derivadas da NAD(P)H oxidase nessa resposta. Nós também avaliamos se ocorreu translocação da p47phox e ativação da NAD(P)H oxidase após o consumo agudo de etanol.
Ratos Wistar machos foram tratados com etanol via oral (1g/kg, p.o. gavagem) ou água (controle). Alguns ratos foram tratados com vitamina C (250 mg/kg, p.o. gavagem, 5 dias) antes de água ou etanol. O leito arterial mesentérico (LAM) foi coleado 30 min após a administração de etanol.
A vitamina C preveniu o aumento da geração de ânion superóxido (O2 -) e lipoperoxidação no LAM induzidos pelo etanol. A atividade da catalase (CAT), da superóxido dismutase (SOD) e os níveis de glutationa reduzida(GSH), nitrato e peróxido de hidrogênio (H2O2) não foram afetados após a ingestão aguda de etanol. A vitamina C e o 4-metilpirazol preveniram o aumento na geração de O2 - induzido pelo etanol em cultura de células do músculo liso vascular (CMLV). O etanol não afetou a fosforilação da proteína quinase B (Akt) e nem da óxido nítrico sintase endotelial (eNOS) (nos resíduos de Ser1177 ou Thr495) ou a reatividade vascular do LAM. A vitamina C preveniu o aumento da razão membrana:citosol da p47phox e a expressão da RhoA no LAM de rato induzido pelo etanol.
A ingestão aguda de etanol induz a ativação da via RhoA/Rho quinase por um mecanismo que envolve a geração de ERO. Nas artérias de resistência, o etanol ativa NAD(P)H oxidase induzindo a translocação da p47phox por um mecanismo redox-sensível.
Programa de Pós-Graduação em Farmacologia - Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - Universidade de São Paulo (USP), SP, Brazil.
Janaina A
JA
Simplicio
Programa de Pós-Graduação em Farmacologia - Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - Universidade de São Paulo (USP), SP, Brazil.
Ulisses Vilela
UV
Hipólito
Programa de Pós-Graduação em Farmacologia - Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - Universidade de São Paulo (USP), SP, Brazil.
Gabriel Tavares do
GT
Vale
University of Ottawa, Canada.
Glaucia Elena
GE
Callera
Programa de Pós-Graduação em Farmacologia - Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - Universidade de São Paulo (USP), SP, Brazil.
Camila André
CA
Pereira
University of Ottawa, Canada.
Rhian M
RM
Touyz
Programa de Pós-Graduação em Farmacologia - Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - Universidade de São Paulo (USP), SP, Brazil.
Rita de Cássia
RC
Tostes
Departamento de Enfermagem Psiquiátrica e Ciências Humanas - Laboratório de Farmacologia - Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto - Universidade de São Paulo (USP); SP, Brazil.
Carlos R
CR
Tirapelli
D000818:Animals; D000975:Antioxidants / Q000494:pharmacology*; D001205:Ascorbic Acid / Q000378:metabolism / Q000494:pharmacology*; D004195:Disease Models, Animal; D004789:Enzyme Activation; D000431:Ethanol / Q000008:administration & dosage*; D008297:Male; D019255:NADPH Oxidases / Q000187:drug effects / Q000378:metabolism*; D018384:Oxidative Stress / Q000187:drug effects*; D021381:Protein Transport; D051381:Rats; D017208:Rats, Wistar; D020742:rhoA GTP-Binding Protein / Q000378:metabolism*
D000975:Antioxidants; D000431:Ethanol; D019255:NADPH Oxidases; D020742:rhoA GTP-Binding Protein; D001205:Ascorbic Acid