title: Improved Methods to Produce Tissue-Engineered Skin Substitutes Suitable for the Permanent Closure of Full-Thickness Skin Injuries.
abstract: There is a clinical need for skin substitutes to replace full-thickness skin loss. Our group has developed a bilayered skin substitute produced from the patient's own fibroblasts and keratinocytes referred to as Self-Assembled Skin Substitute (SASS). After cell isolation and expansion, the current time required to produce SASS is 45 days. We aimed to optimize the manufacturing process to standardize the production of SASS and to reduce production time. The new approach consisted in seeding keratinocytes on a fibroblast-derived tissue sheet before its detachment from the culture plate. Four days following keratinocyte seeding, the resulting tissue was stacked on two fibroblast-derived tissue sheets and cultured at the air-liquid interface for 10 days. The resulting total production time was 31 days. An alternative method adapted to more contractile fibroblasts was also developed. It consisted in adding a peripheral frame before seeding fibroblasts in the culture plate. SASSs produced by both new methods shared similar histology, contractile behaviorin vitroandin vivoevolution after grafting onto mice when compared with SASSs produced by the 45-day standard method. In conclusion, the new approach for the production of high-quality human skin substitutes should allow an earlier autologous grafting for the treatment of severely burned patients.
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Danielle
authors.initials: D
authors.lastname: Larouche
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Laurence
authors.initials: L
authors.lastname: Cantin-Warren
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Maxime
authors.initials: M
authors.lastname: Desgagné
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Rina
authors.initials: R
authors.lastname: Guignard
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Israël
authors.initials: I
authors.lastname: Martel
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Akram
authors.initials: A
authors.lastname: Ayoub
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Amélie
authors.initials: A
authors.lastname: Lavoie
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.; Centre Québécois sur les Matériaux Fonctionnels (CQMF), Québec, Canada.
authors.forename: Robert
authors.initials: R
authors.lastname: Gauvin
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: François A
authors.initials: FA
authors.lastname: Auger
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Véronique J
authors.initials: VJ
authors.lastname: Moulin
authors.affiliation: Département de Chirurgie, Faculté de Médecine, Centre de Recherche en Organogénèse Expérimentale de l'Université Laval/LOEX, Université Laval, Québec, Canada.; Centre de Recherche du CHU de Québec-Université Laval, Axe Médecine Régénératrice, Québec, Canada.
authors.forename: Lucie
authors.initials: L
authors.lastname: Germain
keywords: autologous; regenerative medicine; skin equivalent; tissue culture; tissue therapy; transplants